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何首烏的實驗室檢驗檢測流程

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增大字體作者：本站來源：本站整理發布時間：2025-12-22 16:02:17

何首烏的實驗室檢驗檢測流程
何首烏的實驗室檢驗檢測流程是一個嚴謹的質量控制體系，旨在全面評估藥材的真偽、純度、安全性及有效性。以下是對該全流程的詳細解析。

一樣品接收與初步處理

實驗室收到何首烏樣品后，第一步是進行規范的登記和前處理。

信息登記與標識：為樣品賦予唯一性編號，詳細記錄其名稱、來源（產地、批次）、送檢日期、送檢人及指定的檢測項目。

性狀檢查：依據《中國藥典》等標準，檢驗員在自然光下觀察藥材的外觀、色澤、表面特征（如皺縮不平、淺溝、橫長皮孔樣突起），檢查質地和斷面特征（特別是皮部是否具有類圓形異型維管束環列形成的“云錦花紋”），并嗅聞氣味、品嘗味道（氣微，味微苦而甘澀）。此步驟可對藥材品質進行初步判斷。

樣品制備：將藥材在適宜溫度下（如55℃）烘干，用粉碎機粉碎，并過篩（通常過四號篩），得到均勻粉末，用于后續的顯微、薄層、含量測定等分析。

二傳統鑒別與常規檢查

此階段主要確認藥材的真偽和基本質量。

顯微鑒別：取粉末制作顯微臨時切片，在顯微鏡下觀察其特有的組織構造和內含物。何首烏粉末的典型特征包括：草酸鈣簇晶（直徑10-160μm）、具緣紋孔導管、棕色細胞及淀粉粒等。此法對于鑒別炮制過的何首烏飲片尤為有用。

薄層色譜（TLC）鑒別：取樣品粉末，加乙醇加熱回流提取，濾液濃縮作為供試品溶液。同時制備何首烏對照藥材溶液。將兩種溶液點于同一硅膠G薄層板上，經特定的展開劑系統（如苯-乙醇或三氯甲烷-甲醇系統）展開，取出晾干后，在紫外光燈下檢視。合格的何首烏樣品，其供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，應顯相同顏色的熒光斑點。此法通過化學指紋圖譜進行鑒別。

常規檢查項目：

水分測定：通常采用烘干法或甲苯法，確保藥材水分不超過規定限度（如不得過10.0%或12.0%），防止霉變。

總灰分測定：用于檢查藥材的無機雜質含量，通常規定限度不超過一定數值。

三現代分子生物學鑒定

對于形態高度相似的近緣物種或混偽品，DNA分子鑒定技術提供了更精確的鑒別手段。

DNA提�。簭臉悠分刑崛』蚪MDNA。針對炮制后DNA可能降解嚴重的情況，可采用改良CTAB法以獲得質量較好的模板。

PCR擴增與檢測：實驗室可能使用商品化的何首烏探針法PCR鑒定試劑盒，或基于特定基因序列（如ITS2、psbA-trnH）設計引物進行等位基因特異性PCR（AS-PCR）或PCR-RFLP分析。

在實時熒光定量PCR中，陽性結果通常表現為檢測通道的Ct值小于或等于35，且擴增曲線呈明顯的S型。

結果可通過瓊脂糖凝膠電泳或更先進的毛細管凝膠電泳進行檢測，后者具有靈敏度高、自動化、可定量等優勢。

結果判讀：通過是否擴增出特定大小的條帶（如191bp）或特定的酶切圖譜，來準確區分何首烏正品與其混偽品。

四指標成分含量測定

含量測定是量化評價何首烏質量的核心，主要采用色譜技術。